Ethidium bromide là gì

Điện di gel DNAThuốc nhuộm phổ cập độc nhất dùng để làm cho những dãy DNA hoặc RNA rất có thể nhận thấy được so với điện di gel agarose là ethidium bromide, thường xuyên được viết tắt là EtBr. Nó vạc huỳnh quang đãng bên dưới tia cực tím Khi được xen vào rãnh chủ yếu của DNA (hoặc RNA). Bằng biện pháp quản lý và vận hành DNA thông qua một gel được điều trị bằng EtBr với hiển thị nó cùng với tia rất tím, ngẫu nhiên dải làm sao cất rộng trăng tròn ng DNA vẫn trở phải rõ ràng. EtBr là một trong những bất chợt đổi mới được nghe biết và tất cả các gạn lọc sửa chữa thay thế bình an rộng, nlỗi GelRed, được cấp dưỡng bởi vì Biotium, kết hợp với rãnh nhỏ

*

SYBR Green I là 1 trong những dấu không sạch khác của dsDNA, được tiếp tế bởi vì Invitroren. Nó tốn kỉm rộng, dẫu vậy 25 lần nhạy cảm rộng, cùng hoàn toàn có thể an ninh rộng EtBr, mặc dù không tồn tại dữ liệu làm sao đề cập tới tính đột nhiên thay đổi hoặc độc tính ở tín đồ.

Bạn đang xem: Ethidium bromide là gì

SYBR Safe là một trong đổi mới thể của SYBR Green được chứng minh có mức độ khiến bỗng đổi thay với độc tính tốt được xem như là chất thải ko nguy hiểm theo nguyên tắc của Liên bang Hoa Kỳ . Nó tất cả độ tinh tế tựa như như EtBr, , cơ mà, giống như SYBR Green, giá cao hơn đáng kể. Tại những tổ quốc địa điểm sẽ phải xử lý rác rưởi thải gian nguy, chi phí cách xử trí hóa học thải EtBr có thể quá xa nấc chênh doanh thu ban đầu.

Vì DNA không nhuộm EtBr ko thấy được được trong ánh nắng thoải mái và tự nhiên, các nhà kỹ thuật kết hợp DNA với các bộ đệm mua nạp âm trước khi thêm các thành phần hỗn hợp vào gel. Việc cài những bộ đệm hữu dụng vị bọn chúng rất có thể thấy được được vào ánh nắng thoải mái và tự nhiên (trái ngược với tia rất tím của EtBr DNA nhuộm), mặt khác trầm tích cùng với DNA (tức thị chúng dịch rời với tốc độ y hệt như DNA tất cả chiều dài nhất định). Xylen xyanol và Bromophenol xanh là dung dịch nhuộm thường thì tìm thấy trong số buồng tải; bọn chúng chạy cùng tốc độ cùng với những đoạn DNA lâu năm 5000 bp và 300 bp theo chiều dọc, tuy vậy vị trí đúng mực không giống nhau với Phần Trăm Phần Trăm của gel. Các dấu hiệu tiến bộ khác ít được sử dụng hơn bao gồm Cresol Red cùng Orange G chạy theo thứ tự khoảng tầm 125 bp và 50 bp.

Xem thêm: Xe Đẩy Cho Bé Thì Mua Hãng Nào An Toàn, Bền Đẹp Hả Các Bác, Top 5 Xe Đẩy Em Bé Tốt Nhất Nên Mua Hiện Nay 2021

Hình dung cũng hoàn toàn có thể có được bằng phương pháp truyền DNA sau khi SDS-PAGE mang lại một màng nitrocelluthảm bại và tiếp nối xúc tiếp với một đầu dò lai. Quá trình này được Gọi là Nam blotting.

Đối với thuốc nhuộm huỳnh quang, sau thời điểm năng lượng điện di, gel được thắp sáng bởi đèn cực tím (thường bằng cách đặt nó vào hộp tia nắng, trong những khi sử dụng thiết bị bảo đảm an toàn để ngăn cản xúc tiếp với tia rất tím). Các vật dụng chiếu sáng hầu hết cũng có đựng những lắp thêm hình hình ảnh có một hình hình họa của gel, sau khoản thời gian thắp sáng với sự phản xạ UV. Ethidium bromide huỳnh quang quẻ màu sắc cam đỏ trong sự hiện hữu của DNA, do nó sẽ intercalated với DNA. Dải DNA cũng rất có thể được cắt thoát khỏi gel, cùng tiếp đến có thể được phối hợp để lấy DNA tinch sạch mát. Gel kế tiếp rất có thể được tự sướng thường với cùng một máy hình họa tiên tiến nhất hoặc polaroid. Mặc mặc dù axit nucleic bị nhuộm color huỳnh quang color cam-đỏ, hình hình ảnh thường xuyên được biểu đạt bởi màu sắc black với white (coi hình). Tổn sợ tia UV tới mẫu mã hoàn toàn có thể làm cho bớt tác dụng của Việc làm việc mẫu mã kế tiếp, nhỏng ligation với nhân phiên bản. Như vậy rất có thể tránh khỏi bằng phương pháp thực hiện một mối cung cấp kích ưa thích ánh nắng màu xanh lá cây với cùng 1 vệt không sạch màu xanh lá cây dễ bị kích say mê nhỏng SYBR xanh hoặc GelGreen.

Nghiên cứu giúp năng lượng điện di gel thường sử dụng những nguyên lý so với hình hình ảnh dựa trên phần mềm, ví dụ như ImageJ.